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[饲料] 酵母菌发酵玉米皮制备菌体蛋白饲料

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宣布于 2018-4-25 09:15:16 | 只看该作者 |只看大图 回帖奖赏 |倒序阅览 |阅览形式

  导读

  玉米皮是玉米淀粉加工的首要副产物之一, 大约占玉米总质量的12%, 但玉米皮并未得到充分运用。开展微生物饲料蛋白是满意其需求的有用途径之一,而且玉米皮是该工业的首选原资料。运用酵母菌将玉米皮转化为优质饲料, 旨在有用运用玉米皮的养分成分, 为菌体蛋白饲料研讨奠定根底。

  1资料与办法

  1.1 资料与试剂

  1.1.1 实验质料
  玉米皮购于商场。
  1.1.2 菌种
  毕赤酵母菌。
  1.1.3 仪器与设备
  高效液相色谱Water 1515;色谱柱:Aminex HPX-87H(300 mm×7.8 mm id,9 μm);RI 示差检测器;活动相:8 mmol/L H2SO4;进样体积:20 μL; 活动相流速:0.5 mL/min;柱温:40 ℃。

  1.2 实验办法

  1.2.1 玉米皮成分的测定
  纤维素、半纤维素含量、木质素含量、粗蛋白质含量、淀粉含量、脂肪含量以及酸水解法的测定。
  1.2.2 酵母菌发酵玉米皮制备饲料蛋白
  厌氧培育需取24 个30 mL 西林瓶, 称取0.6 g 玉米皮,参加30 mL 蒸馏水; 好氧培育需取24 个100 mL三角瓶(提早洗净,烘干),均称取0.6 g 玉米皮,参加30 mL 蒸馏水,盖胶塞,压铝盖后放入1.5 MPa,121 ℃压力锅中灭菌。在操作前,需先在超净工作台内灭菌30 min,再接入1.5 mL 酵母菌液(5%接菌量), 置于25 ℃,150 r/min 的培育箱内培育菌种。每24 个瓶培育一个时刻梯度,分别为24、48 h。调查不同培育时刻和需氧状况对毕赤酵母菌体的影响。
  1.2.3 微生物饲猜中菌体浓度测定
  将培育好的菌液置于振动器上振动5 min, 使菌落脱离玉米皮。再将菌液倒入离心管中,3000 r/min 离心5 min。然后取上清液倒入比色皿中,置于分光光度计内,测定OD560。
  1.2.4 微生物饲猜中菌体数测定
  因为原菌液浓度太大,给计数带来极大不方便,故需预先稀释。本次所选用的稀释办法为: 预备数个装有9 mL 蒸馏水30 mL 西林瓶, 取1 mL 菌液增加到一个西林瓶中,依此梯度稀释5 个浓度,考虑到在操作过程中简单染菌,所以运用压过盖的西林瓶稀释,然后再运用血球板计数(沈萍等,2007)。
  1.2.5 乙醇产值的测定
  1.2.5.1 活动相制造
  先用抽滤瓶抽取少数二次水,清洗抽滤瓶内壁,将清洗后的水倒出。再用抽滤瓶抽取约1000 mL 二次水后,再用超声波清洗器超声0.5 h,之后将其内的屈臣氏水参加到仪器储液瓶中。
  1.2.5.2 规范样品的装备
  乙醇2 g,72%的硫酸溶液5 mL,最后用二次水稀释到1 L。
  1.2.5.3 样品溶液的制造
  取培育好的菌液上清液950 μL 和50 μL 的10%的硫酸溶液参加到离心管中,4 ℃、15000 r/min 冷冻离心3 min。取出上清液置于另一离心管中, 在上述相同的条件下再离心3 min, 相同取出上清液经0.22 μm 水相过滤头过滤后置于进样瓶中,开端测样。

  2成果与剖析

  2.1 玉米皮组分的剖析

  纤维素含量约为24.80%、半纤维素含量为47.68%、蛋白质含量为11.49%、淀粉含量为15.50%、脂肪含量为2.73%以及木质素含量为5.41%。这与Palmarola-Adrados 等(2005)的研讨近乎相同。


  2.2 酵母菌发酵玉米皮制备饲料蛋白

  2.2.1 培育条件对菌种浓度的影响
  厌氧条件下培育48 h 时,毕赤酵母菌体个数为2.31×107个/mL,相较于其他培育条件下,菌体浓度最高。


  2.2.2 蛋白胨增加量对菌种浓度的影响
  蛋白胨增加量为0g 时,毕赤酵母菌体数量为2.31×107个/mL, 高于其他条件下培育的菌体数量。


  2.2.3 纤维素与半纤维素的降解率
  经过以上实验成果得知,在以玉米皮为底物时,厌氧培育48 h往后的菌液浓度显着高于24 h 的菌体浓度,厌氧条件下比好氧条件菌体浓度高, 所以对该条件下培育后的剩下培育基中的纤维素和半纤维素成分进行测定,成果见表4。


  经过微生物发酵, 玉米皮中纤维素含量由16.40%变到6.22%,半纤维素含量由47.68%变到33.45%,阐明毕赤酵母菌使玉米皮中的纤维素和半纤维素得以降解,供己所需,这可能是因为毕赤酵母菌发生某种可降解纤维素的酶。跟着养分成分的不断增加, 菌体浓度也会随之上升, 与培育48 h 菌体浓度高于24 h 定论共同。

  2.2.4 乙醇产值
  经高效液相色谱测定, 得到并无乙醇发生。

  3评论与小结

  研讨发现,玉米皮中含有丰厚的纤维类物质, 其间包含有30% ~ 50%的半纤维、10% ~ 20%纤维素以及微量的木质素。本实验成果表明,玉米皮中的纤维类物质含量很高,其间纤维素含量为16.40%, 木质素含量为5.41%,而半纤维素含量高达47.68%,淀粉含量为15.50%,蛋白质含量为11.49%,在丈量时会因质料的产地及种类不同略有差异。别的, 毕赤酵母菌能够有用的发酵玉米皮, 经过显微镜直接计数法和分光光度法均证明, 在以玉米皮为底物时, 厌氧培育48 h 往后的菌液浓度显着高于24 h 的菌体浓度,厌氧条件下比好氧条件菌体浓度高, 这一现象可能是因为在起先接入毕赤酵母菌时, 首先会运用一部分木糖保持, 致使培育前期酵母处于推迟期成长,菌体数目增加不显着,一起木糖的耗费较少(陈晓萍,2009); 培育后期酵母处于指数成长期,酵母数急剧增加, 一起开端耗费玉米皮中的纤维素。对剩下培育基成分进行测定发现,玉米皮中纤维素含量由16.40%降到6.22%,半纤维素含量由47.68%降到33.45%,远高于乔君毅(2008)研讨的纤维素和半纤维素的降解率水平, 达到了玉米皮成分得以转化的作用, 在发酵过程中并未发生乙醇等影响饲料出产的有毒物质, 契合其作为微生物饲料的基本要求。

  注:本文由生物饲料开发国家工程研讨中心(BFC)小编收拾发布,如有任何主张或定见及投稿等,请您加小编微信(13260429991)沟通互动。
  责编:马维军;审理:于继英 博士
  (来历:我国饲料;作者:王雅波, 刘占英等)


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沙发
宣布于 2018-5-6 09:45:35 | 只看该作者
发酵类质料是往后的宗旨嘛
板凳
宣布于 2018-6-26 10:01:00 | 只看该作者
毕赤酵母不在增加剂目录里是个问题,用纤维质料培育酵母立题蛮古怪,酵母对纤维、蛋白的降解和运用才能非常有限。
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